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抗原抗體檢測方法知多少
發布日期:2022/12/6 11:10:49
1、抗原抗體的認識
抗原(antigen,Ag)是指能與T細胞、B細胞抗原受體或抗體特異性結合,具有啟動免疫應答潛能的物質。抗原分子表面具有特殊立體構型和免疫活性的化學基團或區域稱為抗原決定簇,又稱抗原表位(Epitope)。機體的免疫應答針對的是抗原表位,它們也是與抗體相結合的部位,我們又稱為抗原表位。

抗體(Ig)是由抗原刺激機體免疫系統后產生,并能與相應抗原發生特異性結合的物質。抗體具有空間結構,也具有抗原決定簇,還可被其他蛋白(如二抗)結合。

 2、抗原抗體的一些蛋白質性質

抗原和抗體均屬于蛋白質;

蛋白質之間存在相互作用,抗原和抗體的結合本質上屬于蛋白質的相互作用;

所有的蛋白都具有空間結構;

任何蛋白質均是一種抗原,抗原和抗體是相對的概念。

〖 ELISA(酶聯免疫吸附實驗) 〗

1、ELISA(酶聯免疫吸附實驗)的介紹 

ELISA是在免疫酶技術的基礎上發展起來的,它將抗原抗體的結合反應與酶反應的敏感性相結合,在抗原抗體結合的過程中通過在抗原或抗體上標記酶,酶和底物的結合使反應液吸光值發生改變,吸光值可被機器識別,機器將吸光值的變化經公式轉化為數字信號,ELISA被廣泛應用在液體樣本中的病原、抗體、激素等有機物質的測定中。

2、ELISA的分類

3、ELISA的原理

它采用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產生顏色反應,用于定量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。

在這種測定方法中有3種必要的試劑:

①固相的抗原或抗體(免疫吸附劑) 

②酶標記的抗原或抗體(標記物)

③酶作用的底物(顯色劑)

利用ELISA測量時,抗原(抗體)先結合在固相載體上,免疫活性保留,加入一種抗體(抗原)與酶結合成的偶聯物(標記物),此偶聯物也保留其原免疫活性與酶活性,當二者反應結合后,被酶催化水解或氧化還原而呈顏色。其所生成的顏色深淺與欲測的抗原(抗體)含量成正比。 生成產物可用肉眼、光學顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(酶標儀)加以測定,簡單迅速,特異性強。

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